我的sybr green从来没冻过，都是4度，但是sybr green的PCRmastermix就另当别论了。tb green与sybr的区别主要有:1，性质:tb green为探针法，而sybr为染色法，Tb green和sybr不同的方法和荧光信号强度。
波林克中SYBRGreenI与dsDNA的结合荧光信号可增强800 ~ 1000倍。在PCR反应体系中，加入过量的SYBRGreenI荧光染料，特异性加入DNA双链后荧光信号增强，而未加入链中的SYBRGreenI染料分子的荧光保持不变，从而保证荧光信号的增强与PCR产物的增加完全同步。可以在退火阶段或延伸阶段测量荧光。注意事项:1。浓度对荧光PCR结果的影响SYBRGreenI的浓度是保证荧光定量PCR实验成功的关键因素。
但是，在高浓度下，PCR反应会被抑制，PCR反应的效率会降低。所以SYBRGreenI的浓度要根据实际情况进行优化，反应的最终浓度在0.2×到1×之间。2.镁离子浓度的影响增加镁离子浓度可以降低SYBRGreenI对PCR反应的抑制作用。我们建议镁离子浓度比不含SYBRGreenI的普通PCR反应高0.5 ~ 3 mm。
SYBRGRENI两步RealTimeRTPCR专用品本试剂盒是以RNA为模板，SYBRGreen嵌合荧光法进行RealTimeRTPCR的专用品。在该试剂盒中，使用了最适合于RealTimeRTPCR的逆转录酶QuantReverseTranscriptase和HotmasterTaqDNApolymerase。
产品特点■ RealTimeRTPCR反应可快速准确分析RNA病毒等微量RNA。■试剂盒采用改良的hotmastertaq聚合酶，具有扩增效率高、扩增灵敏度高、扩增特异性高的特点。■试剂盒中使用的QuantReverseTranscriptase纯度高，性能稳定，能够完成高效快速的逆转录反应。
3、SYBR®Green室温过夜还能用吗没有问题。如果母液浓度较高，建议稀释，分装，冷冻，即使在室温下稀释过夜。但要注意尽可能避免反复冻融，这比在保质期内保持在4度更容易导致降解。我的sybr green从来没冻过，都是4度，但是sybr green的PCRmastermix就另当别论了。
4、SYBR greenPCR溶解曲线有何意义?类似电泳，但比电泳更灵敏，更清晰。\r通过溶出曲线，可以知道目标产物的TM值，是否有杂质峰。普通溶出曲线和电泳结果相对准确。当然，也可以对最终片段进行测序，以最终确定目标产物。\r要点是:根据溶出曲线，可以确定以下几点:\ra。扩增产物是否单一，即是否含有引物二聚体等其他非目的产物。如果溶解曲线在大约90度处突然下降，则产品是纯的。
\r可能用途比较多，最常用的两个要点就是这两个。\r溶出曲线有对应的曲线，看起来更方便。\rDNA溶解曲线表明扩增产物的特异性。\r曲线的横坐标是温度，每个温度点一个横坐标。一般60到98度的纵坐标是荧光强度的变化值(不是强度本身)。加热开始时，虽然荧光强度比较强，但由于双链没有解离，荧光强度保持不变。
博灵科的5、博凌科为的TUREscriptSYBRGreenqRT-PCRKit(两步法荧光定量反转录...
TUREscriptSYBRGreenqRTPCRKit(两步荧光定量逆转录试剂盒)由两个试剂盒组成。一个是逆转录第一链合成试剂盒turescript 1 ststrandcdna synthesis kit(PC18)，另一个是2 xsybrgrinqpcrmix(PC33)。首先用逆转录一链试剂盒合成cDNA，然后以cDNA为模板，用2xSYBRGreenqPCRMix进行荧光定量PCR扩增。
6、RealMasterMix(SYBRGreen博凌科维的产品很好，很多实验室都在用。这个牌子挺值得信赖的！RealMasterMix是使用SYBRGreen进行RealTimePCR扩增的全新预混合系统。RealMasterMix含有dNTP、增强剂、稳定剂等。具有优化的比例以提高产品特异性和反应灵敏度。同时加入ROX作为内标染料，使RealTimePCR中的荧光达到最佳状态。
7、如何设计 sybr green法荧光定量pcr引物primer荧光定量PCR是利用荧光定量PCR仪器(如ABI7500、stepone、ROCheLightCycler、BioRadCFX96等)对初始模板量进行定量分析。)实时跟踪PCR每个循环的荧光信号值。成功的荧光定量PCR反应不仅需要稳定的仪器、高质量的Taq酶和良好的模板质量，还需要高质量的引物对。获得高质量引物对的前提是引物的设计必须精细化。
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(1)利用NCBI数据库，查询基因序列。登录NCBI官方主页:。在栏目项中选择“基因”，输入“IL6homo”作为关键词，如下图，点击“搜索”。(2)结果如下。一般第一个基因就是要查询的基因，所以我们需要注意这里的“别名”一栏，因为很多基因都有很多别名，所以查询的时候需要注意。定义基因后，直接点击进入人类IL-6基因主页。
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8、taqman和 sybr green的区别taqman是探针法，SYBRGreen是染色法。一般来说，SYBRGreen不如Taqman特异，因为没有特异探针，但如果SYBRGreen的结果是特异的(可以通过溶出曲线验证)，就没有问题。相反，有时候SYBRGreen的扩增曲线更漂亮。
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9、tb green和 sybr区别不同的方法和荧光信号强度。1.方法:taqman采用探针法，SYBRGreen一般采用染色法。2.荧光信号强度。SYBRGreen的荧光信号强度与双链DNA的数量有关，而taqman的荧光信号强度与周围光照有关。tb green与sybr的区别主要有:1。性质:tb green为探针法，而sybr为染色法。
3.荧光信号强度:sybr的荧光信号强度与双链DNA的数量有关，而tb green的荧光信号强度与周围光照有关。4.放大曲线:有时候sybr的放大曲线更漂亮，总的来说，tb green和sybr在性质、特异性、荧光信号强度和扩增曲线上有明显的差异。选择正确的染料或探针取决于研究的具体需要和实验条件。
