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梯度洗脱原理,高效液相色谱梯度洗脱原理

来源:整理 时间:2023-08-24 18:11:46 编辑:一表 手机版

5、液相色谱仪使用及工作 原理。

液相色谱仪是利用液固或不互溶液体之间分配比的差异,先将混合物分离,再进行分析鉴定的仪器。广泛应用于生物化学、食品分析、医学研究、环境分析、无机分析等领域。高效液相色谱与结构仪器的结合是一个重要的发展方向。液相色谱仪的工作原理:系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中液相色谱仪的流动相由高压泵泵入系统,样品溶液通过进样器进入流动相,由流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同,当它们相对运动时,经过反复的吸附和解吸分配过程,各组分的运动速度差异很大,被分离成单个组分,依次流出色谱柱,经过检测器时,样品浓度被转换成电信号传输到记录仪,数据以图谱的形式打印出来。HPLC仪器主要包括进样系统、输注系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。下面将描述它们各自的组成和特性。

6、氨基酸展开剂选择 原理

显影剂的比例取决于试验。一般根据文献报道的这类化合物用什么样的展开剂,先试用这类展开剂,然后不断尝试配比,直到找到分离效果好的展开剂。显影剂的选择条件:①对所需组分有良好的溶解性;②能分离成分;③待测组分的Rf在0.2 ~ 0.8之间,定量测定在0.3 ~ 0.5之间;(4)不与待测组分或吸附剂发生化学反应;⑤沸点适中,粘度低;⑥展开后,组分斑点圆而集中;⑦混合溶剂最好是新鲜配制的。

7、高效液相色谱法 原理

HPLC 原理如下:1 .高压:流动相是液体,流过色谱柱时受到很大阻力。为了快速通过色谱柱,必须对载液施加高压。2.速度快:分析速度快,载液流速快,比经典液相色谱快很多。通常分析一个样品需要15到30分钟,有些样品甚至可以在5分钟内完成,不到1小时。3.效率高:分离效率高。可以选择固定相和流动相,达到最佳的分离效果,比工业蒸馏塔和气相色谱仪高出许多倍。

5.应用范围广:高效液相色谱可以分析70%以上的有机化合物,特别是沸点高、大分子、极性强、热稳定性差的化合物的分离分析,显示出优势。6.色谱柱可以重复使用:不同的化合物可以通过一根色谱柱分离。7.样品体积小,易于回收:样品通过色谱柱后不被破坏,可以收集或制备单一组分。在高效液相色谱分析过程中,储液瓶中的溶剂被泵吸入色谱系统,然后输出,经过流量和压力测量后,再引入进样器。

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8、高效液相色谱 原理

高效液相色谱以经典色谱为基础,引用了气相色谱的理论。技术上,流动相改为高压输送(最大输送压力可达4.9107 pa);色谱柱以特殊方式填充小粒径填料,使柱效远高于经典液相色谱(每米塔板数可达数万或数十万);同时在柱后连接一个高灵敏度的检测器,可以连续检测流出液。特点:1。高压:液相色谱以液体为流动相(称为载液),液体流经色谱柱,受到的阻力很大。为了快速通过色谱柱,必须对载液施加高压。

2.高速:柱内流动相流速比经典色谱快得多,一般可达1 ~ 10 ml/min。高效液相色谱所需的分析时间比经典液相色谱少得多,一般不到1小时,3.高效:最近开发了很多新的固定相,大大提高了分离效率。4.高灵敏度:高灵敏度检测器已广泛应用于高效液相色谱,进一步提高了分析的灵敏度,比如荧光检测器的灵敏度可以达到1011g g,另外,样品量很小,一般只有几微升。

文章TAG:洗脱梯度原理色谱液相梯度洗脱原理

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