是否用干冰配制冷冻-2/能否先解冻再用液氮冷冻不知是不是包埋剂。(3) 切片:可以处理包埋的石蜡块切片;的厚度大约是5微米..冷冻切片是相对于石蜡切片,合适的组织包埋剂是获得高质量冷冻组织的关键切片,扩展资料:切片技术从冻结切片开始,后来逐渐发展更新,冷冻切片由石蜡切片和火棉胶切片制成。石蜡切片和火棉胶切片耗时太长,生产中使用了很多化学试剂,石蜡切片也需要加热过程,因此一些重要的不稳定组织成分如脂类、酶、抗体等可能会被溶解破坏。
1、求大神支招染E-cadherin冰冻 切片荧光染色,我的步骤是PFA固定15min,PBS...取出膜室温风干,用丙酮20预冷后固定10min,用PBST3x5min,BSA室温放置1h,用一抗过夜,用二抗室温放置1h,用DAPI封膜。冷冻切片速冻组织的免疫组化染色步骤将组织块平放于软塑料盖或专用盒(直径2cm)中。如果组织块较小,加入适量OCT 包埋剂使组织浸没,然后将专用盒慢慢平放在装有液氮的小杯中。当盒子底部接触到液氮时,它就会开始汽化和沸腾。此时,盒子应保持在原位,不应浸入液氮中。
冷冻切片4~8mm,若冷冻后未染色切片,必须干燥后放入低温冰箱保存,或短暂预固后放入冰箱保存。室温静置30分钟后,加入4℃丙酮,固定10分钟。也可根据需要选择其他固定方式。PBS洗,5分钟×3。用3%过氧化氢孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗,5分钟×3。
2、200分求科研实验 切片的操作网上没有,说明难度不是很大。祝你成功,选择我。这其实就是常规组织切片技术组织切片制备和染色技术(1)常规石蜡的制备切片: (1)取材和固定:切组织时要用锋利的刀和剪刀,切组织块时要从刀根处向后拉。组织块厚度约为0.2~0.3cm,大小以1.5cmx1.5cmx0.3cm为宜,组织块用10%福尔马林溶液固定24~48h。
(3) 切片:可以处理包埋的石蜡块切片;的厚度大约是5微米..(2)苏木精-伊红(He)染色法:(1)脱蜡:主要用二甲苯脱蜡。(2)梯度乙醇水合。(3)自来水冲洗。(4)苏木精染色:将水合的切片浸泡在苏木精染色液中5-20min,使细胞核染色。用自来水冲洗3~5min。(5) 1%盐酸乙醇分化5~30s。
3、跪求,真的很感谢,石蜡 切片制作中,封片前制好的 切片需要再次脱水吗。为...必需。切片一系列工作完成后,需要对胶片进行染色和封膜。因为要染色的切片还是用石蜡包裹的,而且使用的染色液是水溶液,所以染色前一定要复水。与固定组织块脱水、透明的步骤相反,石蜡切片首先将石蜡溶解在二甲苯中,然后通过各种级别的酒精,向下流到水中。染色后,如果组织中有水分,光线不应该是透明的,显微镜下观察不清楚组织的结构,必须脱水。给你看一下我们学校的实验讲义吧~希望对你有帮助~有什么不懂的就问我吧~实验一石蜡包埋切片技术实验目的:1。学习石蜡包埋的基本原理和步骤切片技术;2.掌握石蜡包埋切片技术。
4、快速冰冻 切片制作方法及经验?所有实验步骤1:新鲜组织在4%多聚甲醛中固定24小时,230%蔗糖脱水48小时以上,325℃包埋(freeze 切片机内)4 freeze切片freeze切片step freeze。用3%过氧化氢孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。PBS洗,5分钟×2次。
(看我之前的帖子)你确定你被冻住了切片?冻住了切片不能热修!以下是我的步骤:1。冻结-2。室温放置30分钟,然后4℃丙酮固定10分钟,PBS洗5分钟×3。用3%双氧水孵育5~10分钟,用PBS洗5分钟×2。25 ~ 10%正常山羊血清(用PBS稀释)密封,室温孵育10分钟。倒出血清,不要洗涤,按适当比例滴加稀释的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小时或4℃过夜。
5、冰冻 切片准确率多高Freeze 切片的准确率在95%左右。冷冻切片是相对于石蜡切片。石蜡切片是病理学的金标准。如果体内有恶性肿瘤或良性疾病,切片后应常规送石蜡切片做病理检查。快速冷冻切片是术中用于病理诊断的方法。病理医师在收到手术标本后15分钟左右做出诊断,并立即致电外科医生,迅速做出下一步治疗决定。扩展资料:切片技术从冻结切片开始,后来逐渐发展更新。冷冻切片由石蜡切片和火棉胶切片制成。石蜡切片和火棉胶切片耗时太长,生产中使用了很多化学试剂。石蜡切片也需要加热过程,因此一些重要的不稳定组织成分如脂类、酶、抗体等可能会被溶解破坏。
6、用干冰制备 冷冻 切片后能否解冻后再用液氮 冷冻不知道是不是包埋剂。冷冻组织切片用于快速临床病理诊断、免疫组织化学和原位杂交。合适的组织包埋剂是获得高质量冷冻组织的关键切片。冷冻组织切片时,-2/冷室、组织块、组织包埋剂之间的温度平衡,冷切片刀非常重要。在优化的-2中,不同类型的组织由于其不同的细胞组成和脂质含量而具有不同的OCT温度。
7、冰冻 切片包埋胶怎么洗才干净1,取出切片,用生理盐水或磷酸盐缓冲液冲洗切片,超声清洗切片浸泡在生理盐水或缓冲液中。2.再次用生理盐水或缓冲液冲洗切片以确保包埋剂表面的切片被完全洗掉,并将切片浸泡在无水乙醇中10分钟,3.在二甲苯中脱水切片3-5分钟,然后使其透明并密封薄膜。对于冷冻切片包埋胶的清洗,可以尝试以下步骤:1,取出切片并用生理盐水或磷酸盐缓冲液冲洗切。